Serological survey of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in shelter-housed cats infected with feline immunodeficiency virus, Brazil / Inquérito sorológico para Neospora caninum e Toxoplasma gondii em um abrigo de gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina, Brasil

Felines play a leading role in the epidemiology of Toxoplasma gondii infection, but there is scarce information about the epidemiology of Neospora caninum, particularly in feline immunodeficiency virus (FIV)-infected cats. Cats seropositive to T. gondii do not usually show symptoms unless they are immunosuppressed, such as FIV-infected cats. The same relationship remains poorly known for N. caninum, although it has been associated with neurological disorders in HIV-infected people. Since FIV-infected cats are prone to develop encephalitis of unknown etiology, this study aimed to evaluate the presence of specific antibodies to T. gondii and N. caninum in a shelter for stray cats naturally infected with FIV. A total of 104 serum samples from cats living in a shelter, located in São Paulo city (Brazil), was assessed for T. gondii and N. caninum specific antibody by indirect fluorescent-antibody test (IFAT). Of the 104 cats, 25 (24%) were infected with FIV and, aside from these, 8 (32%) had antibodies against T. gondii (titers from 16 to 128). Only 1 (4%) of the FIV-infected cats had antibodies against N. caninum, which was the first record of coinfection. Among the FIV-naïve cats, 11 (14%) were positive for T. gondii(titers from 16 to 256) and only 1 (1.2%) had antibodies against N. caninum. Serologically positive reactions to T. gondii and N. caninum were not correlated with age or sex (p>0.05), and there was no correlation between FIV and the occurrence of anti-T. gondii or anti-N. caninum antibodies (p>0.05). Further studies encompassing larger cat populations from different origins and locations are essential to clarify the prevalence of T. gondii and N. caninum antibodies in FIV-positive cats.(AU)

Os felinos têm um papel importante na epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii, mas pouco se sabe sobre a epidemiologia da infecção por Neospora caninum em gatos, particularmente em gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina (FIV). Gatos soropositivos para Toxoplasma gondii geralmente não apresentam sintomas a não ser que estejam imunossuprimidos, como gatos infectados com FIV. A mesma relação ainda é pouco conhecida para N. caninum, embora tenha sido associada a distúrbios neurológicos em pessoas infectadas pelo HIV. Considerando que gatos infectados com FIV são propensos a desenvolver encefalite de etiologia desconhecida, o presente estudo teve como objetivo avaliar a presença de anticorpos específicos para T. gondii e N. caninum em gatos infectados com FIV. Um total de 104 amostras de soro de gatos residentes em um abrigo na cidade de São Paulo, Brasil, foram avaliadas para a presença de anticorpos contra T. gondii e N. caninum pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). Dos 104 gatos, 25 (24%) estavam infectados com FIV e destes 8, (32%) tinham anticorpos contra T. gondii (titulação entre 16 e 128). Apenas 1 (4%) dos gatos infectados com FIV apresentava anticorpos contra N. caninum, sendo este o primeiro registro dessa coinfecção. Entre os gatos não infectados com FIV, 11 (14%) foram positivos para T. gondii (titulação entre 16 e 256) e apenas 1 (1,2%) tinha anticorpos contra N. caninum. A reação sorologicamente positiva para T. gondii e N. caninum não foi correlacionada com a idade ou sexo (p> 0,05), nem houve correlação entre FIV e ocorrência de anticorpos para T. gondii ou N. caninum(p> 0,05). Estudos subsequentes abrangendo populações maiores de gatos de diferentes origens e locais são essenciais para esclarecer a prevalência de anticorpos contra T. gondii e N. caninum em animais acometidos por FIV.(AU)

Detecção do vírus da imunodeficiência felina em gatos domésticos (Felis catus) pela técnica de reação em cadeia da polimerase / Detection of feline immunodeficiency virus in domestic cats (Felis catus) by polymerase chain reaction technique

O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de DNA do Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) em gatos domesticos (Feliz catus) assintomáticos. Foi realizada a tecnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em 50 animais. Para tal, foram coletadas amostras de sangue, por venopunção da jugular, de forma asséptica para armazenamento de 1-2 mL de sangue total. Os animais que participaram do estudo fizeram parte do projeto de castração "Vida digna" da Universidade Federal Rural da Amazônia. E a escolha dos animais foi realizada de maneira aleatória, sem distinção por sexo ou idade, resultando em 29 foram fêmeas e 21 machos. Para o diagnóstico, foi realizada a extração do DNA, em seguida as amostras foram testadas em duas reações de PCR utilizando- se dois conjuntos de primers do Gene gag de FIV. Achou-se uma prevalência de 2% (1/50), confirmando assim a presença do vírus na cidade de Belém. Assim, evidenciando a importância de testar os felinos mesmo sendo assintomáticos. Desta forma, faz-se necessário a realização de trabalhos futuros que amplie o número amostral dos animais testados para assim elucidar o perfil epidemiológico da doença na região de Belém do Pará, considerando a relevância clínica desta infecção e a correta conduta médica veterinária para evitar novas infecções.

The objective of this work was to detect the presence of Feline Immunodeficiency Virus (FIV) proviral DNA in asymptomatic domestic cats (Feliz catus). The polymerase chain reaction technique was performed from 50 animals. For this, blood samples were collected by jugular venipuncture, aseptically for storage of 1-2 mL of whole blood. The animals that participated in the study were part of the castration project "Vida digna" at the Universidade Federal Rural da Amazônia. And the choice of animals was performed randomly, without distinction by sex or age, resulting in 29 females and 21 males. For diagnosis, DNA extraction was performed, then the samples were tested in two PCR reactions using two sets of FIV gag gene primers. A prevalence of 2% (1/50) was observed, thus confirming the presence of the virus in the city of Belém. Thus, highlighting the importance of testing the felines even if they are asymptomatic. Therefore, it is necessary to carry out future work that expands the sample number of animals tested in order to elucidate the epidemiological profile of the disease in the region of Belém do Pará, considering the clinical relevance of this infection and the correct veterinary medical conduct to avoid new infections.

Serological and molecular investigation of Leishmania spp. infection in cats from an area endemic for canine and human leishmaniasis in Northeast Brazil / Investigação sorológica e molecular da infecção por Leishmania spp. em gatos provenientes de uma área endêmica para leishmaniose canina e humana no nordeste brasileiro

Abstract The aim of this study was to investigate the occurrence of Leishmania spp. antibodies, and its association with feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV), in domestic cats from an area endemic for canine and human leishmaniasis in Rio Grande do Norte State, Brazil. Ninety-one cats were subjected to a complete clinical exam, and blood samples were collected. An epidemiological questionnaire was used to investigate the risk factors. IgG anti-Leishmania spp. antibodies were detected by immunofluorescence antibody test (IFAT), with a cut-off value of 1:40. Polymerase chain reaction (PCR) was performed to detect genetic material of Leishmania spp. in the blood samples. The presence of antibodies against FIV and antigens of FeLV was evaluated using an immunochromatographic test. Seropositivity for Leishmania spp., FIV, and FeLV was observed in 14/91 (15.38%), 26/91 (28.57%), and 3/91 (3.29%) cats, respectively. All samples gave negative results on PCR analysis. Based on these data, no significant statistical association was observed between seropositivity for Leishmania spp., and sex, age, presence of clinical signs, evaluated risk factors, and positivity for retroviruses. These findings demonstrated for the first time that cats from Mossoró, Rio Grande do Norte, are being exposed to this zoonosis and might be part of the epidemiological chain of transmission of visceral leishmaniasis.

Resumo O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos contra Leishmania spp., e sua associação com o vírus da imunodeficiência felina (FIV) e o vírus da leucemia felina (FeLV), em felinos domésticos provenientes de uma área endêmica no estado do Rio Grande do Norte, para a leishmaniose visceral canina e humana. Noventa e um gatos foram submetidos a exame clínico completo e amostras de sangue foram coletadas. Um questionário epidemiológico foi feito para investigar fatores de risco. Anticorpos IgG anti-Leishmania spp. foram identificados por meio da imunofluorescência indireta (RIFI), adotando-se como ponto de corte a diluição de 1:40. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi executada visando detectar o material genético de Leishmania spp. a partir de amostras de sangue total. Para avaliar a presença de anticorpos contra o FIV e antígenos do FeLV foi utilizado um teste imunocromatográfico. Observou-se soropositividade em 14/91 (15,38%), 26/91 (28,57%) e 3/91 (3,29%) animais para Leishmania spp., FIV e FeLV, respectivamente. Nenhuma amostra foi positiva na PCR. Baseado nestes dados, não foi observada nenhuma associação estatística significativa entre a soropositividade para Leishmania spp. e gênero, idade, presença de sinais clínicos, fatores de risco avaliados e positividade para as retroviroses. Esses achados demonstram pela primeira vez que felinos da cidade Mossoró, Rio Grande do Norte, estão sendo expostos a esta zoonose, sugerindo que os mesmos podem estar participando da cadeia epidemiológica de transmissão da leishmaniose visceral.

Detection of hemoplasma and Bartonella species and co-infection with retroviruses in cats subjected to a spaying/neutering program in Jaboticabal, SP, Brazil / Detecção de hemoplasmas e Bartonella sp. e co-infecção com retrovírus em gatos submetidos a um programa de castração/esterilização em Jaboticabal, SP, Brasil

Hemotrophic mycoplasmas and Bartonella species are important pathogens that circulate between cats and invertebrate hosts, occasionally causing diseases in humans. Nevertheless, there are few reports on occurrences of these agents in cats in Brazil. The present study aimed to detect the presence of hemoplasma and Bartonella DNA by means of PCR and sequencing. FIV antigens and anti-FeLV antibodies, were studied by using a commercial kit on blood and serum samples, respectively, among 46 cats that were sampled during a spaying/neutering campaign conducted in Jaboticabal, SP. Three (6.5%) cats were positive for hemoplasmas: two (4.3%) for 'Candidatus M. haemominutum' and one (2.2%) for both M. haemofelis and 'Candidatus M. turicensis'. One of the two 'Candidatus M. haemominutum'-infected cats was also positive for FeLV antigens and showed antibodies for FIV. Two cats (4.3%) were positive for B. henselae. One of them was also positive for FeLV antigens. Eight cats (17.4%) were positive for FeLV, and just one (2.2%) showed anti-FIV antibodies. Bartonella species and hemoplasmas associated with infection due to retroviruses can circulate among apparently healthy cats.

Micoplasmas hemotróficos e espécies de Bartonella são importantes patógenos que circulam entre gatos e hospedeiros invertebrados, causando ocasionalmente doenças no homem. Apesar disto, poucos são os estudos acerca da ocorrência destes agentes entre gatos no Brasil. O presente estudo objetivou detectar o DNA de hemoplasmas e Bartonella sp. pela PCR e sequenciamento. Antígeno de FIV e anticorpos anti-FeLV foram estudados utilizando um "kit" comercial, em amostras de sangue e soro, respectivamente, de 46 gatos amostrados em uma campanha de castração em Jaboticabal, SP. Três gatos (6,5%) foram positivos para hemoplasmas: dois (4,3%) para 'Candidatus M. haemominutum' e um (2,2%) para M. haemofelis and 'Candidatus M. turicensis'. Um dos gatos positivos para 'Candidatus M. haemominutum' mostrou-se também positivo na detecção de antígeno de FeLV e de anticorpos para FIV. Dois (4,3%) gatos mostraram-se positivos para B. henselae, sendo que um deles também se mostrou positivo para antígeno de FeLV. Oito gatos (17,4%) foram positivos para FeLV, e apenas um gato mostrou anticorpos anti-FIV. Bartonella sp. e hemoplasmas associados à infecção por retrovírus podem circular entre gatos aparentemente saudáveis.

Evaluation of expression patterns of feline CD28 and CTLA-4 in feline immunodeficiency virus (FIV)-infected and FIV antigen-induced PBMC

It is known that CD28, a positive costimulatory receptor, plays a very important role in inducing the optimal stimulation of T lymphocytes. CTLA-4 (CD152), however, acts as a negative regulator in T lymphocyte activation. The effect of an feline immunodeficiency virus (FIV) infection on the expression of feline CD28 and CTLA-4 was studied with FIV-infected and uninfected peripheral blood mononuclear cells (PBMC) using a competitive PCR assay. The nature of CD28 and CTLA-4 expression was also examined with fresh and antigen-stimulated PBMC. FIV infection induced a lower expression of CD28, but a higher expression of CTLA-4 in the infected PBMC than in the uninfected PBMC. Relatively high levels of CD28 expression were demonstrated in both the fresh and the antigen-stimulated PBMC. The expression level of CTLA-4 in the freshly isolated PBMC was rather low, however, FIV antigen stimulation induced a relatively high expression of CTLA-4 in feline PBMC.